cDNA

מתוך ויקיפדיה, האנציקלופדיה החופשית
קפיצה אל: ניווט, חיפוש
קטע ממערך DNA בו מופיע CDNA

cDNA (קיצור של Complementary DNA, "דנ"א משלים") הוא מולקולת DNA המסונתזת על בסיס תבנית של mRNA.

cDNA נוצר בתאים אשר נדבקו ברטרו וירוס המכילים חומר גנטי מסוג RNA ואנזים Reverse Transcriptase אשר באמצעותו התא יוצר שעתוק הפוך ליצירת cDNA. הדנ"א המשלים משועתק במנגנונים העצמאיים של התא ל-RNA של הוירוס ובכך התא משבט את הרטרו וירוס שבו הוא נדבק.

על פי הדוֹגמה המרכזית של הביולוגיה המולקולרית, DNA עובר תהליך של שעתוק שמשתמש בו כתבנית ליצירת mRNA. הלה משמש כתבנית לסינתזת חלבון בתהליך התרגום. בתאים איקריוטיים, לעומת תאים פרוקריוטיים, קיימים בתוך רצף הגן, בין האקסונים אשר משעתקים ל-mRNA בשל, אינטרונים, אשר מוצאים מן ה-mRNA בתהליך השחבור. בתאים פרוקריוטיים, כאמור, לגנים אין אינטרונים ותהליך השחבור אינו מתרחש.

פעמים רבות בביולוגיה מולקולרית קיים צורך לבטא גנים מייצור איקריוטי בתאים פרוקריוטיים. לכאורה, אפשר היה פשוט להכניס לתא הפרוקריוטי רצף DNA שנשלף מהגנום האיקריוטי ולגרום לו להשתעתק, למשל על ידי שימוש בפלסמיד מתאים. אולם קיומם של האינטרונים, שלתא הפרוקריוטי אין כלים לסלק אותם, מקשה על המלאכה. לשם כך משתמשים ב-cDNA, שאינו מכיל את האינטרונים, ועובר תהליכים נוספים אשר מכינים אותו לביטוי בתא פרוקריוטי.

מספר שיטות לייצור cDNA נמצאות בשימוש, אך הנפוצה שבהן מייצרת cDNA מ-mRNA בוגר (נטול אינטרונים) על ידי שימוש באנזים רוורס טרנסקריפטאז, אשר מסוגל לסנתז גדיל DNA על גבי תבנית של גדיל RNA.

בנוסף לתפקידו בשיבוט משמש cDNA גם לייצור ספריות cDNA ושבבי DNA.